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la biologie cellulaire c'est quoi???
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:: les biologistes :: PCM (Physiologie Cellulaire et moléculaire)
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la biologie cellulaire c'est quoi???
par miss kaw Mar 12 Mai - 10:59
La biologie cellulaire, ou cytologie, est une discipline de la biologie étudiant les cellules et leurs organites, les processus vitaux qui s'y déroulent ainsi que les mécanismes permettant leur survie (reproduction, métabolisme, homéostasie, néguentropie, communication) sans oublier la caractéristique principale de la cellule vivante, à savoir, la mort, qui peut être est programmée génétiquement (apoptose) ou être le résultat d'une agression (nécrose).
L'histologie est quant à elle l'étude des cellules à un niveau supérieur, c'est-à-dire de leurs agencements en tissus et de leurs interactions (jonctions cellulaires simples, etc.).
la biochimie elle est l'étude des molécules du vivant et des réactions chimiques ayant lieu dans la cellule par exemple.
L'histologie est quant à elle l'étude des cellules à un niveau supérieur, c'est-à-dire de leurs agencements en tissus et de leurs interactions (jonctions cellulaires simples, etc.).
la biochimie elle est l'étude des molécules du vivant et des réactions chimiques ayant lieu dans la cellule par exemple.
miss kaw- Membre Actif
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histoire: quelques dates
par miss kaw Mar 12 Mai - 11:01
17éme siecle
Robert Hooke:
on lui attribura la premiére observation d'une cellule biologique et fera de nombreuse observation au microscope. Son livre Micrographia deviendra rapidement un best celler
Antonie van Leeuwenhoek :
il est un des précurseur de la biocell et de la microbiologie
on lui doit l'invention du premier microscope optique (photonique) et la découverte des protozoaires ainsi que de l'animalcules ds le sperme ms surtout il décrivit de façon précise les globules rouges
René Joachim Henri Dutrochet (medecin):
definit la vie par le mouvement "vivre c'est bouger,l'absence de mouvement est la mort"
tout dérive de la cellule chez les végétaux et animaux
Schwan et Schleiden:
schwan (animaux) schleiden (végétaux) ---> ils mettent en doctrine les travaux de Dutrochet et autre, c'est la doctrine de la théorie cellulaire
Rudolf Virchow (1821-1902), physiologiste allemand:
"Omni cellula e cellula"
tte cellule dérivent d'une cellule préexistante
et la somme d'unité vital (cellule) = être vivant
1er biologiste a s'être penché sur les patho cellulaire
Pasteur
a partir de 1859 il récuse la théorie de la génération spontané selon laquelle « la vie pourrait apparaître à partir de rien, et les microbes être générés spontanément ».
1953 Watson et Krick
molécule d'ADN en double hélice
1965 Jacob,Monod et Lwoff
ADN --> ARN ---> Protéines
Varmus,Bischoff et Stéhelin
il découvre en 1976 le premier oncogéne (géne du cancer)
proto oncogéne : géne déclanchant le cancer et pouvant être a l'origine de tumeur
Année 2000
étude de la génétique !! de la thérapie génique .... .... ...
Robert Hooke:
on lui attribura la premiére observation d'une cellule biologique et fera de nombreuse observation au microscope. Son livre Micrographia deviendra rapidement un best celler
Antonie van Leeuwenhoek :
il est un des précurseur de la biocell et de la microbiologie
on lui doit l'invention du premier microscope optique (photonique) et la découverte des protozoaires ainsi que de l'animalcules ds le sperme ms surtout il décrivit de façon précise les globules rouges
René Joachim Henri Dutrochet (medecin):
definit la vie par le mouvement "vivre c'est bouger,l'absence de mouvement est la mort"
tout dérive de la cellule chez les végétaux et animaux
Schwan et Schleiden:
schwan (animaux) schleiden (végétaux) ---> ils mettent en doctrine les travaux de Dutrochet et autre, c'est la doctrine de la théorie cellulaire
Rudolf Virchow (1821-1902), physiologiste allemand:
"Omni cellula e cellula"
tte cellule dérivent d'une cellule préexistante
et la somme d'unité vital (cellule) = être vivant
1er biologiste a s'être penché sur les patho cellulaire
Pasteur
a partir de 1859 il récuse la théorie de la génération spontané selon laquelle « la vie pourrait apparaître à partir de rien, et les microbes être générés spontanément ».
1953 Watson et Krick
molécule d'ADN en double hélice
1965 Jacob,Monod et Lwoff
ADN --> ARN ---> Protéines
Varmus,Bischoff et Stéhelin
il découvre en 1976 le premier oncogéne (géne du cancer)
proto oncogéne : géne déclanchant le cancer et pouvant être a l'origine de tumeur
Année 2000
étude de la génétique !! de la thérapie génique .... .... ...
miss kaw- Membre Actif
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Micro-organisme
par miss kaw Mar 12 Mai - 11:03
on trouve
Les protistes inférieurs ou procaryotes (du grec: noyau primitif) ont une structure cellulaire différente de celle de tous les autres organismes : ce groupe inclut les bactéries, les cyanobactéries (algues bleues) et les rickettsies (parasites intracellulaires obligés).
les procaryotes sont les plus primitif dans l'évolution,le matériel génétique est dans le cytoplasme sans protection d'un noyau !!! la compartimentalisation n'est pas encore présente.
Les protistes supérieurs ou eucaryotes (du grec : noyau vrai) ressemblent aux végétaux et aux animaux dans leur structure cellulaire : ce sont les algues, les champignons inférieurs et les protozoaires.
les eucaryotes différent des procaryotes par le fait de la compartimentalisation cellulaire apparu avc l'évolution (des réactions chimiques,role de protection,....)
on distingue également protozoaires (unicellulaire = une cellule) de métazoaires (pluricellulaire =plusieurs)
les virus eu sont différent par le fait qu'il ne sont pas capable d'autoréplication. ce sont des particules non cellulaires
ils doivent parasiter et se servir de la machinerie cellulaire pour se reproduire,on parle alors de rétrovirus. Un retrovirus connu : le SIDA
ils sont responsables ds bcp de cas de certN pathologie humaines.
Les protistes inférieurs ou procaryotes (du grec: noyau primitif) ont une structure cellulaire différente de celle de tous les autres organismes : ce groupe inclut les bactéries, les cyanobactéries (algues bleues) et les rickettsies (parasites intracellulaires obligés).
les procaryotes sont les plus primitif dans l'évolution,le matériel génétique est dans le cytoplasme sans protection d'un noyau !!! la compartimentalisation n'est pas encore présente.
Les protistes supérieurs ou eucaryotes (du grec : noyau vrai) ressemblent aux végétaux et aux animaux dans leur structure cellulaire : ce sont les algues, les champignons inférieurs et les protozoaires.
les eucaryotes différent des procaryotes par le fait de la compartimentalisation cellulaire apparu avc l'évolution (des réactions chimiques,role de protection,....)
on distingue également protozoaires (unicellulaire = une cellule) de métazoaires (pluricellulaire =plusieurs)
les virus eu sont différent par le fait qu'il ne sont pas capable d'autoréplication. ce sont des particules non cellulaires
ils doivent parasiter et se servir de la machinerie cellulaire pour se reproduire,on parle alors de rétrovirus. Un retrovirus connu : le SIDA
ils sont responsables ds bcp de cas de certN pathologie humaines.
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Generalité sur la cellule eucaryote humaine
par miss kaw Mar 12 Mai - 11:05
nous avons vu les différents micro organismes
l'homme est un métazoaire:il est composé de multitude de cellules dérivant d'une cellule originel appelé cellule oeuf ou zygote qui en se divisant et en se différentiant formeront l'ensemble des cellules de l'organisme.
tte cellules fini par mourir,leur duré de vie et variable en fonction des cellules
ainsi les cellules sanguines ont une duré de vie courte et sont remplacer rapidement
tandis que les cellules nerveuses qui ont une différentiation importante ne sont jms remplacé (sauf exeption,ce qui pose probléme dans le cas de destruction de ces cellules) et ont une durée de vie plus longue.
la forme des cellules est variable selon les cellules !!
ex forme concave des hématies
forme focille ds le cas de la drépanocytose
assemblage de cellule formant des tissu qui selon la forme des cellule qui le composent sont des tissu cubique,pavimenteux ...
De même les tailles sont très variable !! taille de référence Hématies 7 micro métre
le fonctions dépendent du lieu ,du moment ...
et la taille peu dépendre de l'activité
la forme peu étre ds bcp de cas adapté a la fonction
on note le rapport nucléo plasmique par la formule : (volume du noyau)/(volume du cytoplasme)
le noyau contient les chromosomes et le matériel génétique
tandis que le cytoplasme contient les différents organites (structure participant au fonctionnement cellulaire) ainsi que de nbreuses molécules formant le cytosquellete
La cellule humaine posséde:
-une membrane plasmique,lieu d'échange,d'interaction,de controle,de communication,et de protection cellulaire....
- un noyau comportant le matériel génétique support de l'information
- divers organites : RE,Apareil de Golgi,lysosomes,peroxisome,mitochondries... que nous verrons plus loin
l'homme est un métazoaire:il est composé de multitude de cellules dérivant d'une cellule originel appelé cellule oeuf ou zygote qui en se divisant et en se différentiant formeront l'ensemble des cellules de l'organisme.
tte cellules fini par mourir,leur duré de vie et variable en fonction des cellules
ainsi les cellules sanguines ont une duré de vie courte et sont remplacer rapidement
tandis que les cellules nerveuses qui ont une différentiation importante ne sont jms remplacé (sauf exeption,ce qui pose probléme dans le cas de destruction de ces cellules) et ont une durée de vie plus longue.
la forme des cellules est variable selon les cellules !!
ex forme concave des hématies
forme focille ds le cas de la drépanocytose
assemblage de cellule formant des tissu qui selon la forme des cellule qui le composent sont des tissu cubique,pavimenteux ...
De même les tailles sont très variable !! taille de référence Hématies 7 micro métre
le fonctions dépendent du lieu ,du moment ...
et la taille peu dépendre de l'activité
la forme peu étre ds bcp de cas adapté a la fonction
on note le rapport nucléo plasmique par la formule : (volume du noyau)/(volume du cytoplasme)
le noyau contient les chromosomes et le matériel génétique
tandis que le cytoplasme contient les différents organites (structure participant au fonctionnement cellulaire) ainsi que de nbreuses molécules formant le cytosquellete
La cellule humaine posséde:
-une membrane plasmique,lieu d'échange,d'interaction,de controle,de communication,et de protection cellulaire....
- un noyau comportant le matériel génétique support de l'information
- divers organites : RE,Apareil de Golgi,lysosomes,peroxisome,mitochondries... que nous verrons plus loin
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Méthode d'étude: Observation microscopique
par miss kaw Mar 12 Mai - 11:07
on trouve diverse microscopie: MO;MET,MEB,...
ils se distinguent par leur composition,leur utilisation,....
leur pouvoir de résolution divergent:
- l'oeil humain: 0,2 mm
- microscopie photonique (MO): 0,2 micro métre
- microscopie electronique: 1,5 à 5 Angström
tous les microscopes sont complémentaires,ainsi le microscope photonique a pouvoir de résolution moins élevé permet l'observation globale de tissu (assemblage de plusieurs cellules) ,tandis que les microscope electronique permet une observation du détail,de ciblé l'observation notamment des organites.on lui doit d'ailleurs la découverte des organites cellulaires.
ils se distinguent par leur composition,leur utilisation,....
leur pouvoir de résolution divergent:
- l'oeil humain: 0,2 mm
- microscopie photonique (MO): 0,2 micro métre
- microscopie electronique: 1,5 à 5 Angström
tous les microscopes sont complémentaires,ainsi le microscope photonique a pouvoir de résolution moins élevé permet l'observation globale de tissu (assemblage de plusieurs cellules) ,tandis que les microscope electronique permet une observation du détail,de ciblé l'observation notamment des organites.on lui doit d'ailleurs la découverte des organites cellulaires.
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Re: la biologie cellulaire c'est quoi???
par toubib1 Mar 12 Mai - 11:10
merci khawla pur ce long topic
je suis encor dans le 2eme mais c'est tres interressant
merci
je suis encor dans le 2eme mais c'est tres interressant
merci
toubib1- Membre Spécial
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a- microscopie photonique
par miss kaw Mar 12 Mai - 11:16
Microscopie optique
Compostion:
le microscope est composé d'une source lumineuse (photons d'ou microscopie photonique) qui traversera un condensateur avt d'atteindre l'échantillon.le faisceau traversera ensuite l'objectif et l'oculaire avt d'arriver a l'oeil. l'image est observé directement.
on distingue:
-a fond claire (vue objet mince coloré)
-a contraste de phase (augmente la visibilité d'objet non coloré)
-d'interface différentiel (image d'apparence tridimensionnelle,joue sur les indices de refraction)
Préparation des échantillons (biopsies cellulaires) :
congelé,fixer,deshydratation (dans un bain d'alcool,remplace l'eau par de la paraffine)
fabrication d'une inclusion,la paraffine devient solide puis on fait des coupes de 5 à 10 micro mètre .
coloration possible: rouge acidophyle
bleu basophyle
Observation: tissu par exemple
Compostion:
le microscope est composé d'une source lumineuse (photons d'ou microscopie photonique) qui traversera un condensateur avt d'atteindre l'échantillon.le faisceau traversera ensuite l'objectif et l'oculaire avt d'arriver a l'oeil. l'image est observé directement.
on distingue:
-a fond claire (vue objet mince coloré)
-a contraste de phase (augmente la visibilité d'objet non coloré)
-d'interface différentiel (image d'apparence tridimensionnelle,joue sur les indices de refraction)
Préparation des échantillons (biopsies cellulaires) :
congelé,fixer,deshydratation (dans un bain d'alcool,remplace l'eau par de la paraffine)
fabrication d'une inclusion,la paraffine devient solide puis on fait des coupes de 5 à 10 micro mètre .
coloration possible: rouge acidophyle
bleu basophyle
Observation: tissu par exemple
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b-microscopie électronique à transmission
par miss kaw Mar 12 Mai - 11:18
Composition et principe :
filament chauffé (source d'électrons (100 000 fois plus petit q'un photon))
traverse des bobines electromagnétiques et anode pr convergé
le faisceau traverse l'échantillon et traverse une lentille (le courant change le grandissement)
puis impressione sur un écran fluorescent. on obtient une image en noir et blanc sur l'écran.
ce qui apparait en blanc a traversé l'échantillon et ce qui est noir a été arrété.
source d'électron ---> condenseur ----> échantillon ----> objectif -----> projecteur -----> image sur écran fluorescent
préparation de l'échantillon:
-le tissu est prélévé et placé dans une solution fixatrice: tétra oxyde d'osmium (fixe les lipides)
formaldehyde-glutaraldehyde (fixe les proteines)
-Après rincage,le tissu est déshydraté en passant par des concentrations croissantes en acétone ou alcool
-inclusion plastique puis placé dans une étuve pour que l'inclusion plastique soit plomymérisé
-coupe obtenues grace a un ultramicrotome avc un couteau en verre ou en diament
-coupe prélevé avc un grille en cuivre
- après séchage,les coupes sont prêtes pour l'observation au ME
filament chauffé (source d'électrons (100 000 fois plus petit q'un photon))
traverse des bobines electromagnétiques et anode pr convergé
le faisceau traverse l'échantillon et traverse une lentille (le courant change le grandissement)
puis impressione sur un écran fluorescent. on obtient une image en noir et blanc sur l'écran.
ce qui apparait en blanc a traversé l'échantillon et ce qui est noir a été arrété.
source d'électron ---> condenseur ----> échantillon ----> objectif -----> projecteur -----> image sur écran fluorescent
préparation de l'échantillon:
-le tissu est prélévé et placé dans une solution fixatrice: tétra oxyde d'osmium (fixe les lipides)
formaldehyde-glutaraldehyde (fixe les proteines)
-Après rincage,le tissu est déshydraté en passant par des concentrations croissantes en acétone ou alcool
-inclusion plastique puis placé dans une étuve pour que l'inclusion plastique soit plomymérisé
-coupe obtenues grace a un ultramicrotome avc un couteau en verre ou en diament
-coupe prélevé avc un grille en cuivre
- après séchage,les coupes sont prêtes pour l'observation au ME
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c - Microscopie electronique à balayage . et autres
par miss kaw Mar 12 Mai - 11:21
image en 3D
même principe que le ME a transmission
on bombarde un échantillon conducteur qui peut être très épaix (traverse peu)
chaque point de métal qui va être bombardé va renvoyé des faisceaux d'électrons secondaires qui vont être repris et formé une vidéo sur un écran
complémentarité des ME
MET: observation architecture interne
MEB: observation vu de dessus. mieu pour observer paroi
Autre microscopie :
microscopie confocale: Un microscope confocal est un système pour lequel l'illumination et la détection sont limités à un même volume de taille réduite : le point focal.
Les images en microscopie à fluorescence classique ont une perte de résolution de l'image due à l'excitation des fluorochromes se situant hors du plan focal. En effet les fluorochromes sont excités par le laser sur toute l'épaisseur de la préparation, ce qui se traduit par une image contaminée par un bruit de fondL'objectif de la microscopie confocale à balayage laser (CLSM pour confocal laser scanning microscopy ) est d'éliminer la lumière provenant des plans défocalisés qui parasitent le plan focal.
ex: observation de 2 éléments,montrer les interactions ... ex : neurones
même principe que le ME a transmission
on bombarde un échantillon conducteur qui peut être très épaix (traverse peu)
chaque point de métal qui va être bombardé va renvoyé des faisceaux d'électrons secondaires qui vont être repris et formé une vidéo sur un écran
complémentarité des ME
MET: observation architecture interne
MEB: observation vu de dessus. mieu pour observer paroi
Autre microscopie :
microscopie confocale: Un microscope confocal est un système pour lequel l'illumination et la détection sont limités à un même volume de taille réduite : le point focal.
Les images en microscopie à fluorescence classique ont une perte de résolution de l'image due à l'excitation des fluorochromes se situant hors du plan focal. En effet les fluorochromes sont excités par le laser sur toute l'épaisseur de la préparation, ce qui se traduit par une image contaminée par un bruit de fondL'objectif de la microscopie confocale à balayage laser (CLSM pour confocal laser scanning microscopy ) est d'éliminer la lumière provenant des plans défocalisés qui parasitent le plan focal.
ex: observation de 2 éléments,montrer les interactions ... ex : neurones
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technique d'étude: Cryofracture et cryodécapage
par miss kaw Mar 12 Mai - 11:23
technique d'observation par le froid
attention : observation en Microscopie Electronique à transmission
étape:
-1) on prend un objet que l'on congéle (vite et froid dans de l'azote liquide a -180°C) pr éviter les cristaux de givre et figer l'objet
- 2) on met l'objet sous vide (sous cloche)
- 3) 4) et on fracture (sous cloche) en faisant un choc avc une lame froide sur la cellule
les fractures "naturelles" se font au endroit de moindre résistance entre les 2 couches de lipides qui forment la membrane (nous verrons cela plus tard)
la fracture rencontrera un autre composant des membranes : les proteines sur lesquelles on aura une resistance!! ainsi le fracture sera dévié en dessous ou au dessus de celle-ci.
- 5)on cré un ombrage métalique à 45° pr qu'une seul face soit marqué
- 6)puis on protége avec une couche de carbone la couche de métal déposé
- 7)on sort de la cloche et on dissous avec de l'eau de javel puis on regarde juste l'empreinte de métal
----> impression de creux et de bosse,relief donnant impression de 3D
cryodécapage
Technique de reproduction dans laquelle des cellules sont gelées à une température très basse et fendues avec une lame trés fines pour exposer les surfaces intérieures des cellules ou des membranes de cellules. Les surfaces craquelées des cellules sont alors lyophilisées pour exposer leurs constituants. Les surfaces sont maintenant prêtes pour être ombragées et regardées en utilisant un microscope électronique. Cette méthode diffère de la rupture par le froid du fait qu'aucun cryoprotectant n'est employé et tient compte, ainsi, de la sublimation de l'eau pendant le processus de lyophilisation pour graver les surfaces.
attention : observation en Microscopie Electronique à transmission
étape:
-1) on prend un objet que l'on congéle (vite et froid dans de l'azote liquide a -180°C) pr éviter les cristaux de givre et figer l'objet
- 2) on met l'objet sous vide (sous cloche)
- 3) 4) et on fracture (sous cloche) en faisant un choc avc une lame froide sur la cellule
les fractures "naturelles" se font au endroit de moindre résistance entre les 2 couches de lipides qui forment la membrane (nous verrons cela plus tard)
la fracture rencontrera un autre composant des membranes : les proteines sur lesquelles on aura une resistance!! ainsi le fracture sera dévié en dessous ou au dessus de celle-ci.
- 5)on cré un ombrage métalique à 45° pr qu'une seul face soit marqué
- 6)puis on protége avec une couche de carbone la couche de métal déposé
- 7)on sort de la cloche et on dissous avec de l'eau de javel puis on regarde juste l'empreinte de métal
----> impression de creux et de bosse,relief donnant impression de 3D
cryodécapage
Technique de reproduction dans laquelle des cellules sont gelées à une température très basse et fendues avec une lame trés fines pour exposer les surfaces intérieures des cellules ou des membranes de cellules. Les surfaces craquelées des cellules sont alors lyophilisées pour exposer leurs constituants. Les surfaces sont maintenant prêtes pour être ombragées et regardées en utilisant un microscope électronique. Cette méthode diffère de la rupture par le froid du fait qu'aucun cryoprotectant n'est employé et tient compte, ainsi, de la sublimation de l'eau pendant le processus de lyophilisation pour graver les surfaces.
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Techniques
par miss kaw Mar 12 Mai - 11:27
Technique: Fractionnement cellulaire
méthode biochimique
-on prend un échantillon
- on broye les cellule à 0°C pr inhiber les réactions enzymatiques
on obtient un homogénat contenant le noyau et les différents constituants de la cellule
- centrifugation
on obtient alors une séparation des constituants selon le poids (surnageant (au dessus) et culaud (en dessous contenant le noyau de la cellule ici) )
la premiére centrifugation permet de récuperer les noyaux
-on recentrifuge le surnageant,nouvelle sédimentation et on obtient les mitochondries et lysosomes dans le culaud
(on augmente la centrifugation et le tps avc l'avancé des étapes)
et on répéte les étapes pr obtenir
3-les microsomes
4- RE et Ribosomes (RE dans la phase du dessus des ribosomes)
Technique: Autohistoradiographie
but : observation des mécanismes de synthése
découvert en marquant les Acides Aminés par un isotope radioactif que l'on va révéler pour visualiser.
on observe l'évolution au cours du tps
ex: les métabolites sont incorporés dans la cellule,puis passe dans les ribosomes,le RE et le Golgi avant d'être incorporé dans des grains de sécrétions et relaché en dehors de la cellule par exocytose.
timing de la synthése,on observe au cours du tps
on travail sur des tissus et cellules vivantes
tout les AA ne sont pas marqués pour voir l'évolution au cours du tps
-marquage avc un isotope radioactif
- fixation à un tps donné
- on met une emulsion photographique (gelatine,grain d'argent)
- on met ensuite dans aluminium et dans le frigo
- emission de rayonnement métaénergétique et ionisant
- on retrouve seulement les grains d'argent réduit (on enleve la gélatine et le reste)
le tps d'exposition dépend de l'isotope choisie
Au ME : les electrons vont s'arréter sur les grains d'argents
on distingue pulse AA marqué et temps de chasse AA non marqué
méthode biochimique
-on prend un échantillon
- on broye les cellule à 0°C pr inhiber les réactions enzymatiques
on obtient un homogénat contenant le noyau et les différents constituants de la cellule
- centrifugation
on obtient alors une séparation des constituants selon le poids (surnageant (au dessus) et culaud (en dessous contenant le noyau de la cellule ici) )
la premiére centrifugation permet de récuperer les noyaux
-on recentrifuge le surnageant,nouvelle sédimentation et on obtient les mitochondries et lysosomes dans le culaud
(on augmente la centrifugation et le tps avc l'avancé des étapes)
et on répéte les étapes pr obtenir
3-les microsomes
4- RE et Ribosomes (RE dans la phase du dessus des ribosomes)
Technique: Autohistoradiographie
but : observation des mécanismes de synthése
découvert en marquant les Acides Aminés par un isotope radioactif que l'on va révéler pour visualiser.
on observe l'évolution au cours du tps
ex: les métabolites sont incorporés dans la cellule,puis passe dans les ribosomes,le RE et le Golgi avant d'être incorporé dans des grains de sécrétions et relaché en dehors de la cellule par exocytose.
timing de la synthése,on observe au cours du tps
on travail sur des tissus et cellules vivantes
tout les AA ne sont pas marqués pour voir l'évolution au cours du tps
-marquage avc un isotope radioactif
- fixation à un tps donné
- on met une emulsion photographique (gelatine,grain d'argent)
- on met ensuite dans aluminium et dans le frigo
- emission de rayonnement métaénergétique et ionisant
- on retrouve seulement les grains d'argent réduit (on enleve la gélatine et le reste)
le tps d'exposition dépend de l'isotope choisie
Au ME : les electrons vont s'arréter sur les grains d'argents
on distingue pulse AA marqué et temps de chasse AA non marqué
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technique: immunocytochimie
par miss kaw Mar 12 Mai - 11:29
technique basé sur la relation antigéné-anticorps
Pour fabriquer des anticorps,on insére la molécule humaine chez un autre organisme (ex lapin) qui reconnaitre cette molécule comme étrangére car n'appartenant pas a son "soi",il fabriquera ainsi les anticorps anti molécule humaine reconnu ici comme un antigéne par le lapin.
Après avoir fabriquer les Anticorps,on les marquent par des molécules fluorescentes (MO) ou des billes d'or (or colloidal) pr le MO MET MEB
on met en contact les Anticorps marqués avc l'antigéne souhaité qui est complémentaire de l'Ac que l'on aura fabriquer
Ainsi on aura marqué la molécule que l'on souhaitai repéré
il existe deux méthodes:
- la méthode direct: les Anticorps sont marqués reconnaissent l'antigéne et s'y accroche
- la méthode indirect: les anticorps marqué seront des anticorps anti anticorps de l'antigéne c a d que l'antigéne sera reconnu par l'anticorps (ici le même que dans la méthode direct mais non marqué) et c'est ce même anticorps qui sera reconnu par les autres anticorps eu marqué. on parle de mise en "sandwich". Avec cette méthode ,on augmente le signal et la spécificité
Marqueurs ------------------------------ MP-----------------------MET -----------------SEM
-fluorochromes------------------- fluorescence -------------------------------------------- -
-fluoresceine ----------------------verte
-rhodamine ----------------------- rouge
DAB
-peroxydase* --------------------> précipité brun-------précipité opaque
H²O²
- or colloïdal------------------------coloration------------------granules----------granules
(protéine A)--------------------------rouge--------------------5<d<20 nm
- ferritine------------------------------------------------------petites particules
---------------------------------------------------------------------opaques
double marquage:
-en MP avec 2 fluorochromes de couleur différente
- au MET avec des particules d'or colloïdal de diametre différent
(NB: * peroxydase dégrade H²O² avec le DAB ce qui donne un précipité)
Pour fabriquer des anticorps,on insére la molécule humaine chez un autre organisme (ex lapin) qui reconnaitre cette molécule comme étrangére car n'appartenant pas a son "soi",il fabriquera ainsi les anticorps anti molécule humaine reconnu ici comme un antigéne par le lapin.
Après avoir fabriquer les Anticorps,on les marquent par des molécules fluorescentes (MO) ou des billes d'or (or colloidal) pr le MO MET MEB
on met en contact les Anticorps marqués avc l'antigéne souhaité qui est complémentaire de l'Ac que l'on aura fabriquer
Ainsi on aura marqué la molécule que l'on souhaitai repéré
il existe deux méthodes:
- la méthode direct: les Anticorps sont marqués reconnaissent l'antigéne et s'y accroche
- la méthode indirect: les anticorps marqué seront des anticorps anti anticorps de l'antigéne c a d que l'antigéne sera reconnu par l'anticorps (ici le même que dans la méthode direct mais non marqué) et c'est ce même anticorps qui sera reconnu par les autres anticorps eu marqué. on parle de mise en "sandwich". Avec cette méthode ,on augmente le signal et la spécificité
Marqueurs ------------------------------ MP-----------------------MET -----------------SEM
-fluorochromes------------------- fluorescence -------------------------------------------- -
-fluoresceine ----------------------verte
-rhodamine ----------------------- rouge
DAB
-peroxydase* --------------------> précipité brun-------précipité opaque
H²O²
- or colloïdal------------------------coloration------------------granules----------granules
(protéine A)--------------------------rouge--------------------5<d<20 nm
- ferritine------------------------------------------------------petites particules
---------------------------------------------------------------------opaques
double marquage:
-en MP avec 2 fluorochromes de couleur différente
- au MET avec des particules d'or colloïdal de diametre différent
(NB: * peroxydase dégrade H²O² avec le DAB ce qui donne un précipité)
miss kaw- Membre Actif
- Messages : 725
inscrit(e) le: : 05/05/2009
Age : 36
Localisation : loin de mon ame
Sali-bio- Membre Actif
- Messages : 452
inscrit(e) le: : 30/04/2009
Age : 34
Localisation : Blida
Re: la biologie cellulaire c'est quoi???
par spiculus Mar 12 Mai - 18:45
trés utile,un sujet au top merci bcp ,salam
spiculus- Membre Spécial
- Messages : 1627
inscrit(e) le: : 06/05/2009
Localisation : EL GHORBA !!
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