Hybridation de l'ADN

par biofella Ven 8 Mai - 20:02

L'hybridation de l’ADN est un principe de biologie moléculaire, basé sur les propriétés d'appariemment des bases complémentaires d'acides nucléiques. Ce principe est utilisé dans différentes techniques permettant la mise en évidence de la présence de molécule d'acide nucléiques particulières, c'est entre autre le principe utilisé pour la phase de visualisation suivant un Northern blot ou un Southern blot.
L'hybridation de l’ADN est également le nom d'une méthode d'analyse phylogénétique développée au début des années 60

Principes

L'ADN natif (non dénaturé) est constitué de deux molécules (chaînes) associées par des liaisons non covalentes. Les deux chaînes sont complémentaires et antiparallèles selon la règle de Chargaff, des liaisons de faible énergie (liaison hydrogène) s’établissant entre leurs bases azotées d'une manière spécifique, ce qui permet de connaitre la séquence d'enchainement des bases d'une chaîne lorsque la séquence de l'autre est connue. Une chaîne libre peut donc s'associer à une autre chaîne libre pourvu que leur séquence soit complémentaires : cette association spécifique est appelée hybridation moléculaire.

L'hybridation de l'ADN comme outil d'analyse

Dénaturation de l'ADN

un premier temps, il faut dénaturer les différentes molécules d’ADN. Un chauffage entre 50°C et 80°C provoque la rupture des liaisons hydrogène et donc la séparation des deux chaînes complémentaires

par biofella Dim 10 Mai - 20:05

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